细数胰腺癌早期诊断标志物
2012-01-18 14:31:23   来源：37度医学网   作者：  评论：0 点击：

　胰腺癌是 严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，死亡率与发病率之比达0.95/1。 2011年发布的全球肿瘤统计数据显示，在常见恶性肿瘤中,胰腺癌的发病率和死亡 率分别位居第13位和第7位,并呈现明显的上升趋势。在中国，以上海为例，胰腺癌的发病率已达中等发达国家水平，死亡率已跃居第5位。85%的胰腺癌患者 在获得诊断时已处于疾病的晚期，使多数患者失去了手术根治的机会，即使经过积极的综合性治疗，其中位生存期也仅为6~9个月，因此早诊断是提高胰腺癌疗效 的最重要手段。

　　然而，早期胰腺癌患者缺乏特异性症状，临床检出和诊断困难，因此对肿瘤标志物的探索已成为当下胰腺癌早期诊断的研究热点。CA19-9是目前胰腺癌最 常用的临床诊断标志物，其敏感性和特异性分别为93.1%和78.3%。胰腺癌患者的血清CA19-9水平通常是正常值的3倍以上或呈持续升高的状态，但 在某些良性胆道和胰腺疾病（例如急慢性胰腺炎、肝炎和胆道梗阻）患者中，CA19-9水平也会升高。其他的肿瘤标志物如癌胚抗原（CEA）、CA242 等，因其敏感性和特异性低而在临床上使用受限。鉴于胰腺癌早期诊断标志物的重要性以及缺乏相关的数据，探索新型肿瘤标志物就显得愈发迫切，本文将就此展开 综述。

　　抗体微阵列技术

　　抗体微阵列是蛋白质微阵列技术的一种，是将抗体作为捕获分子固定于载体表面来进行免疫分析的技术。

　　霍艾泽尔（Hoheisel）等建立了胰腺癌抗体微阵列平台，并采用彩色预染蛋白质分子量标准，对胰腺癌患者和健康对照者的血液和尿液进行分析，结果 获得了很高的准确性和可重复性。其优势在于不需要预先去除血液中的脂质和高丰度的蛋白质，从而简化了流程，节约了时间，同时避免了样本处理所致的偏倚。

　　桑奇兹（Sanchez）等发现，包含254个抗体的微阵列在检测血清蛋白表达谱时，敏感性可高达93.7%，并且通过免疫组化、组织芯片技术验证了 血清蛋白中差异表达最高的c-met与胰腺癌患者的分期、生存率相关。这些研究结果为胰腺癌免疫诊断芯片的开发奠定了一定的基础。

　　上述研究表明，抗体微阵列技术在生物标志物筛查中具有应用前景，但将其广泛用于临床还有待进一步的研究和完善。

　　蛋白标志物

　　黄（Hwang）等通过免疫组化分析发现，胰腺癌组织中UL16结合蛋白2（ULBP2）的水平比邻近的正常胰腺组织高，并且所有胰腺癌患者的血清 ULBP2水平均显著高于健康人群 （P＜0.0001）。中国台湾长庚大学研究者的研究结果表明，在胰腺的早期诊断中，ULBP2的诊断效果（敏感性和 特异性）优于CA19-9，二者联合诊断胰腺癌的效果比单用任何一种标志物都更佳。对于其他肿瘤例如胃癌、结直肠癌以及鼻咽癌，并没有发现ULBP2水平 的增高。

　　高迁移率族蛋白A1（HMGA1）是依靠cDNA微阵列技术发现的另一种潜在的肿瘤标志物。它是一种结构性转录因子，通过与DNA分子结合来调节基因 的表达。多数胰腺导管腺癌存在KRAS 基因突变，该突变使下游信号通路出现异常，最终导致了肿瘤的发生。研究人员的早期研究显示，在90%以上胰腺导管 腺癌患者的癌组织中，HMGA1水平显著升高，其通过调节Ras/ERK信号通路来产生致癌效应。特雷夫（Treff）等采用RNA靶向干扰法来降低胰腺 癌细胞HMGA1的表达，结果发现癌细胞的侵袭性和增殖能力均显著下降，同时出现了对药物的增敏作用，而在对照组中胰腺癌细胞出现了抵抗依赖细胞基质的凋 亡现象。此外塔尔贝（Tarbe）等发现，在胰腺导管腺癌中，HMGA1基因的高表达与癌细胞的转移潜能相关。

　　在胰液中寻找胰腺癌早期诊断标志物也取得了一定的进展。中国山东省医学科学院的研究者通过蛋白质印迹技术，分别对9例胰腺导管腺癌患者和健康对照者的 胰液进行了分析，结果发现在胰液内差异表达的几种蛋白中，胰腺导管腺癌患者的基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达上调，显著高于健康对照者。后续的研究 对不同人群的血清MMP-9水平进行了比较，结果表明，胰腺导管腺癌患者的血清MMP-9水平显著高于慢性胰腺炎患者（P=0.009）和健康人群 （P=0.027）。这些研究结果为MMP-9作为早期诊断标志物提供了依据。

　　微小RNA（miRNA）

　　miRNA是长度约为21 nt的无编码功能的小分子RNA，其通过和靶 mRNA特定序列互补或不完全互补结合，诱导靶mRNA降解或阻止其翻译而 发挥作用。在真核细胞的基因表达、细胞发育分化等方面，miRNA起着重要的调控作用，同时也有望成为胰腺癌早期诊断的重要生物标志物。

　　miRNA在包括胰腺癌的多种肿瘤中发挥重要作用。研究者通过细针穿刺对可疑胰腺癌患者的组织进行了分析，结果发现miRNA-217仅存在于健康人 体的胰腺组织中，而miRNA-196a仅出现在胰腺导管腺癌患者的组织中，并且二者均呈现出极高的特异性。后续的研究表明，胰腺导管腺癌患者癌变组织中 的miRNA-196a含量越高，患者的生存期就越短。戈金斯等的研究结果显示，在胰腺癌和慢性胰腺炎患者中，血清miRNA-200a和miRNA- 200b的水平显著升高。

　　2011年，有学者报告，通过对miRNA-196a、miRNA-210、miRNA-375等的检测，可将胰腺导管腺癌诊断的准确性提高2~3倍。

　　目前有越来越多的研究结果显示了miRNA在胰腺癌早期诊断中的前景，但由于miRNA种类、结构的多样性以及受到现有技术的制约，将miRNA用于胰腺癌的早期诊断还有待进一步的研究。

　　基因相关标志物

　　胰腺癌的发生发展是遗传和表遗传突变不断积累的过程，这已经得到全基因组关联研究（GWAS）以及日本研究结果的证实。

　　一项对胰腺癌患者（n=3851）和健康对照者（n=3934)的551766个单核苷酸多态性（SNP）进行的研究显示，8个分布于3个染色体区域 的SNP可影响胰腺癌的发病风险，两个SNP位于染色体13q22.1的非转录区（Kruppel样转录因子KLF5和KLF12之间），KLF5在胰腺 癌中过表达，从而介导非KRAS/RAF/MAPK/ERK信号传导通路。5个SNP位于染色体1q32.1的105kb区域，包含NR5A2基因，该基 因与胰腺的发育和内稳态有关，也和脂联素基因的激活相关，这进一步确立了肥胖与胰腺癌发病风险增加的相关性。1个SNP位于染色体5p15.33的 CLPTM1L基因的内含子上，CLPTM1L与肿瘤的 发生相关。

　　在日本人群中进行的第一项GWAS分析显示，与胰腺癌相关的SNP位于3个染色体（6p25.3、12p11.21和7q36.2）区域，这些SNP与胰腺癌发病风险的中度增加相关。

　　上述研究均为回顾性的，为了让这些研究结果更好地用来预测胰腺癌的发病风险，还需要将这些基因标志物与流行病学危险因素结合起来，并进行前瞻性研究。

　　■小结

　　虽然有关胰腺癌早期诊断标志物的研究已取得了一定的进展，但多为回顾性研究，尚缺乏有关敏感性、特异性及安全性的数据。随着转化医学研究的不断深入，相信不久的将来一定会取得重要突破。

作者：上海交通大学附属第一人民医院 上海交通大学胰腺癌诊治中心 胡海 崔玖洁 王理伟